—多重荧光PCR法血液精准输注、血小板建库利器[检验原理]采用实时荧光PCR法,其结合Taqman探针技术和扩增阻碍突变系统设计特异性引物与探针。设计了9组引物探针,以FAM/ROX/HEX/CY5作为标记,18个等位基因分布于6个反应管,每次检测6管反应,即可检测出HPA 1～6/10/15/21基因型别。[产品特点] 特异:基于多重荧光探针PCR法,实现HPA 1～6、10、15、21位点基因的定性分型;简便:可兼容市面大部分qPCR仪。无需电泳、智能软件分析、便捷可靠;效率:检测时间短, 从样本加样到分型结果输出仅需1小时;省样:可同时检测同一样本的多个目标序列,样本需求量少。[位点选择依据]据相关资料统计,目前中国人群HPA位点除1-6、10、15、21具备多态性外,其余位点基因型别均为aa,暂未发现其他位点多态性。来源:---- EMBL-EBI免疫多态性数据库(国际性生命科学中开放数据的倡导者)调查显示HPA-21bw在中国人群的等位基因频率(0.50%)与日本人群相当(0.53%),符合亚裔人群(基因频率0.56%)的人群分布特征。来源:----《两例罕见的血小板抗原HPA-21bw等位基因报告》 中国免疫学杂志2013年第29卷除上述位点,中国人群暂时没有报道其他相关位点的出现。如有其它特殊位点需要检测,可定制相应试剂盒[检验流程] 1.反应体系配制(10min) 2. 荧光定量PCR反应(50min) 3. 仪器精确判读结果(1S) [检验意义]1.HPA是血小板本身固有的抗原,具有多态性,从而引起相应位置的单个氨基酸变异。2.若血小板同种抗原不匹配,可导致受血者机体产生血小板同种抗体,引起同种免疫性血小板减少症、输血后紫癜、血小板输注无效等。3.建立HPA基因供者库,为患者提供相同型别的血小板制剂,可最大程度保证血小板输注的安全性、有效性,对临床输血有重大意义。

检测原理:由已知人类主要组织相容性抗原分子基因序列设计特异性引物及探针,当引物序列与待测标的序列能完全配合时,引物进行聚合酶链锁反应。特殊核酸片段将被进行复制与放大,同时探针结合上待测标的序列并藉由聚合酶的分解作用产生荧光。荧光反应产生表示在样本中存在与特异性引物匹配的目的基因序列,反之则否。检测意义:HLA-B*1502等位基因已被证实与汉族人群因服用精神科常用药物卡马西平引起的史蒂芬-琼森症候群(Steven-Johnson Syndrome, SJS)以及临床上致死率高达30%的毒性表皮坏死松解症(Toxic Epidermal necrolysis, TEN)有高度的关联性。研究发现,带有HLA-B*1502基因的病患如果服用此药,引起此两种症狀的严重药物过敏机率将比一般人高了193～1300倍。据可靠统计,中国人群中携带HLA-B*1502等位基因的比率超过10%。因此,通过检测HLA-B*1502等位基因是否携带,可降低患者服用卡马西平诱发SJS/TEN的风险。(美国FDA及日本,台湾等地的医疗监管部门已明确要求医生在对亚裔人群使用卡马西平前,必须进行HLA-B*1502基因检测,并且此项检测已纳入医保范围。)产品特点:特异:基于荧光探针PCR方法,特异性比普通PCR和荧光染料PCR的方法更高准确:用三个反应孔进行扩增,每个反应孔均含特异性引物和探针及内对照引物和探针,最大限度的分出HLA-B*1502型别简便:操作简单,无需电泳省时:检测时间短,约一小时完成检测可靠:质控过关,结果可靠防污染:无需进行电泳,防止电泳过程中的污染